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Kit Act-T4 Cell™

 

Cada vez cobra más importancia la investigación clínica sobre la presencia y extensión de la inmunidad celular mediada por células T antígeno específicas y es necesaria la implantación de ensayos funcionales que permitan su estudio estandarizado.

 

Recientemente se ha desarrollado un sencillo método que permite el estudio en sangre de las células T CD4+ activadas, que se caracterizan por la co-expresión de las moléculas CD134 y CD25 (método OX40) y que ofrece resultados concordantes con otros métodos tradicionales y más laboriosos de detección de células T CD4+ antígeno específicas. Varios estudios han validado el uso preclínico de este método en respuesta a virus como CMV, EBV, VHC, VIH, etc. o a bacterias como Mycobacterium tuberculosis, pero también puede utilizarse como medida de la inmunocompetencia general del organismo en respuesta a mitógenos.


El kit Act-T4 Cell™ se utiliza después de incubar la sangre durante 44-48 horas con medio de cultivo y los antígenos/mitógenos de interés. En el ensayo se recomienda usar un tubo control positivo con mitógeno como la fitohemaglutinina (PHA) o el enteroantígeno estafilocócico B (SEB), y un tubo control negativo con sangre no estimulada. La combinación de anticuerpos propuesta en el kit permite la identificación de las células T CD4+ antígeno específicas activadas (células T CD4+CD134+CD25+).

 

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 Para más información consulte el documento de Notas Técnicas

 

Clinical investigations into the presence and extent of antigen-specific T cell immunity are becoming more relevant at present. Therefore the necessity for antigen-specific functional CD4 T cell assays in routine diagnostic clinical laboratories is real. Recently, a whole blood technique involving flow cytometry and detection CD25 and CD134 (OX40) expression on the surface of activated CD4+ T cells (OX40 assay) was demonstrated to be highly accurate. The results obtained were concordant with those obtained from more traditional methods of antigen-specific T cell detection. Several studies have validated the preclinical use of this method against virus (e.g., CMV, EBV, HCV, HIV) or bacteria (e.g., Mycobacterium tuberculosis), which can also be used to evaluate general immunocompentence against mitogens.

Act-T4 Cell™ kit is intended to be used after incubating whole blood during 44-48 hours in a culture medium with the antigens/mitogens of interest. The use of a positive control (mitogens such as phytohaemagluttinin or staphylococcal enteroantigen B) and a negative control (unstimulated whole blood) are highly recommended. The antibody combination proposed enables the selection of activated antigen-specific CD4+ T cells (CD3+CD4+CD134+CD25+ cells).

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